1737-ben Prágában született. Apja jómódú malomtulajdonos volt. Josef Joseph Segernél tanult. Első szimfóniáit nagy sikerrel játszották 1762-ben és a fiatalember úgy döntött, a zenei pályát választja. Waldstein gróf támogatásával 1763-ban Velencébe ment, ahol Giovanni Pescettinél tanult. Az ismertséget és sikert az “Il Bellerofonte” c. opera hozta meg számára, 1767-ben. Az “Il Boemo” névvel illetett Myslivecek 1770-ben ismerkedett meg az akkor 14 éves Mozarttal, aki nagy tisztelője lett. Myslivecek kora legjobban fizetett zeneszerzője volt, de vagyonát gyorsan elverte: anyagi gondjai mellett egészsége is megrendült. 1781-ben szegényen és elfeledetten halt meg Rómában.
